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표제지
목차
제1장 서론 7
제2장 PI3K-PKB/Akt Pathway 9
제3장 Cell Culture 원리와 프로토콜 13
3.1. Transfection 13
3.2. Immunoprecipitation(IP) Assay 15
3.3. Western Blotting 16
3.3.1. SDS-PAGE 17
3.3.2. Blotting 18
3.4. Knock Down 20
3.4.1. Serum-Starvation 24
3.4.2. IGF Treatment 25
제4장 실험 26
1) Akt와 Tip60가 직접적로 상호관계에 있다. 26
2) Tip60가 Akt의 아세틸화에 관여한다. 26
3) Akt interact with C-terminus of Tip60. 27
4) Phospho-Akt decreased in knock-down of Tip60. 28
5) Akt phosphorylated by Tip60 through the agency of IGF. 29
6) IGF에 respose한 Akt를 Tip60가 acetylation시킨다. 30
제5장 결론 32
참고문헌 34
Abstract 37
국문요약 38
그림 1. RTKs via PI3K 신호 동선의 PKB/AKT가 활성화인 하위 신호. 10
그림 2. 신호 발생으로 활성화된 PKB/Akt와 PKB/Akt에 의한 세포내 기능의 관계성. 12
그림 3. Tip60와 Akt가 서로 상호관계에 있다. 27
그림 4. AKt Tip60dp 의해 아세틸화 된다. 27
그림 5. Akt가 TIP60의 C-terminus와 결합한다. 28
그림 6. Phospho-Akt가 Tip60가 없을 때 줄어든다. 29
그림 7. Akt는 IGF를 통한 Tip60에 의해 phosphorylation된다. 30
그림 8. IGF에 respose한 Akt를 Tip60가 아세틸화시킨다. 31
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Protein kinase B로도 잘 알려진 serine-theronin kinase인 Akt는 세포의 증식과 분화에 관여하며 많은 암종에서 과 발현되어 있다는 것이 보고되어왔다. 이런 Akt가 GSK3를 phosphorylation시킨다는 보고가 기존에 있었고 GSK3에 의해 TIP60가 phosphorylation된다는 보고가 있었다. 그렇다면 이 두 단백질, Tip60와 Akt가 어떠한 직접적인 상관관계를 이루지 않을까하는 의문점으로 연구를 진행하게 되었다.
결과 Tip60가 Akt와의 직접적인 상관관계를 확인했으며, Tip60가 Akt를 아세틸화시키는 가능성을 보았고, Tip60를 knock-down 시킨 후 IGF를 투여함으로써 Tip60가 Akt의 세포막 localization에 관여하는 신호 동선에서 Akt를 phosphorylation시키는 것 또한 알 수 있었다.
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