[표제지 등]
제출문
요약문
Summary
칼라
목차
제1장 서론 34
제2장 실험 재료및 방법 42
제1절 펩타이드의 합성 42
제2절 항균활성의 측정 43
2.1. 균주들과 배양조건 43
2.2. 최소생육저지농도 (MIC) 조사 43
2.3. 시간에 따른 lactoferricin 유래 유사체 펩타이드의 미생물 성장 억제효과 43
2.4. 락토페리신 유래펩타이드에 의한 대장균의 세포외막 파괴능 측정 44
제3절 용혈 활성의 측정 44
제4절 접합 펩타이드의 항암활성 45
제5절 항진균 활성측정 45
5.1. 사용균주 및 배지조성 45
5.2. 항진균 활성 측정 46
5.2.1. F. oxysporum에 대한 항진균활성 측정 46
5.2.2. A. fumigatus에 대한 항진균활성 측정 46
5.2.3. T. beigelii에 대한 항진균활성 측정 47
5.3. (1,3)-β-D-glucan synthase 활성 측정 47
5.4, FACScan analysis 48
5.5. Confocal Laser Scanning Microscopy(CLSM) analysis 48
제6절 항균 펩타이드가 리포좀막에 미치는 영향 조사 49
6.1. 형광성물질이 포획된 리포좀의 제조 49
6.2. 항균펩타이드에 의한 리포좀막의 파괴능 조사 49
6.3. 리포좀막에 의한 펩타이드의 구조 변화 측정 50
제7절 항균 펩타이드 2차 구조 측정 50
제3장 결과 및 고찰 52
제1절 Lactoferricin 유래 유사체 펩타이드의 항균활성과 2차구조와의 상관관계 조사 52
1.1. Lactoferricin 유래 유사체 펩타이드의 항균 활성 측정 및 비교 52
1.2. 시간에 따른 lactoferricin 유래 유사체 펩타이드의 미생물 성장 억제효과 55
1.3. Lactoferricin 유래유사체 펩타이드의 세포외막 파괴능조사 59
1.4. Lactoferricin 유래 유사체 펩타이드의 2차구조 측정 59
제2절 Agar hole method에 의한 접합 항균펩타이드의 항균 및 적혈구 용혈활성 62
2.1. 접합 펩타이드의 설계 및 합성 62
2.2. 접합 펩타이드의 항균 활성 63
2.3. 접합 펩타이드의 적혈구 용혈 활성 64
제3절 CA-MA, CA-ME 접합 펩타이드 및 이들 유사체들의 항균활성 68
3.1. CA-MA, CA-ME 접합 펩타이드 및 이들 유사체들의 합성 68
3.2. CA-MA, CA-ME 접합 펩타이드 및 이들 유사체들의 항균활성 69
제4절 CA-MA, CA-ME 접합 펩타이드 및 이들 유사체들의 항암 및 용혈활성 74
제5절 CA-MA, CA-ME 접합 펩타이드 및 이들 유사체들의 2차구조 78
제6절 항균 펩타이드가 리포좀막에 미치는 영향 조사 81
6.1. CA-MA 유사체 펩타이드에 의한 리포좀 막의 파괴능 조사 81
6.2. 리포좀막에 의한 펩타이드의 구조 변화 측정 86
제7절 접합 펩타이드의 항진균활성 89
7.1. Melittin Hybrid 합성펩타이드가 Fusarium oxysporum의 성장에 미치는 저해효과 89
7.2. Magainin Hybrid 합성펩타이드가 Aspergillus fumigatus의 성장에 미치는 저해효과 94
7.3. Melittin analogue 합성펩타이드가 Trichosporon beigelii의 성장에 미치는 저해효과 97
참고문헌 101
연구성과 106
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Contents
I. Introduction 34
II. Materials and Method 42
1. Synthesis of peptides 42
2. Determination of antibacterial activities 43
2.1. Strains and culture conditions 43
2.2. Determination of minimal inhibitory concentration (MIC) 43
2.3. Bacterial growth inhibtion kinetics by lactoferricin-derived peptide 43
2.4. Determination of outer membrane disruption by lactoferricin-derived peptide 44
3. Hemolytic assays 44
4. Determination of antitumor activities 45
5. Determination of antifungal(antifulgal) activities 45
5.1. Strains and media 45
5.2. Determination of antifungal(antifulgal) activities 46
5.2.1. Determination of antifungal(antifulgal) activities against F. oxysporum 46
5.2.2. Determination of antifungal(antifulgal) activities against A. fumigatus 46
5.2.3. Determination of antifungal(antifulgal) activities against T. beigelli 47
5.3. Measurements of (1,3)-β-D-glucan synthase activity 47
5.4. FACScan analysis 48
5.5. Confocal Laser Scanning Microscopy (CLSM) analysis 48
6. Effects of antimicrobial peptides on liposome 49
6.1. Preparation of fluorescent probes-entrapped liposomes 49
6.2. Measurements of liposome disruption by antimicrobial peptides 49
6.3. Analysis of structural changes of antimicrobial peptides by phospholipid vesicles 50
7. Secondary structure analysis of antimicrobial peptides 50
III. Results and Discussion 52
1. Relationships between antimicrobial activity and the secondary structures of the peptides 52
1.1. Antimicrobial activities of lactoferricin-derived peptides 52
1.2. Bacterial growth inhibtion kinetics by lactoferricin-derived peptide 55
1.3. Determination of outer membrane disruption by lactoferricin-derived peptide 59
1.4. Secondary structure analysis of lactoferricin -derived peptide 59
2. Determination of antimicrobial activities of hybrid peptides using agar hole method and hemolytic assays 62
2.1. Design and synthesis of hybrid peptides 62
2.2. Antimicrobial activities of hybrid peptides 63
2.3. Hemolysis activities of hybrid peptides 64
3. Determination of antimicrobial activities of CA-MA, CA-ME, and their analogues 68
3.1. Synthesis of CA-MA, CA-ME, and their analogues 68
3.2. Antimicrobial activities of CA-MA, CA-ME, and their analogues 69
4. Determination of antitumor and hemolytic activities of CA-MA, CA-ME, and their analogues 74
5. Secondary structures of CA-MA, CA-ME, and their analogues 78
6. Effects of antimicrobial peptides on liposome 81
6.1. Measurements of liposome disruption by antimicrobial peptides 81
6.2. Analysis of structural changes of antimicrobial peptides by phospholipid vesicles 86
7. Assays of antifungal activities of hybrid peptides 89
7.1. Determination of antifungal(antifulgal) activities of melittin hybrid peptides against F. oxysporum 89
7.2. Determination of antifungal(antifulgal) activities of magainin hybrid peptides against A. furrelgatus 94
7.3. Determination of antifungal(antifulgal) activities of melittin analogues against T. beigelli 97
References 101
Publications and patents 106