CHAPTER I. Lyn 에 의한 rpS3 의 인산화에 따른 MDR1(Multi-Drug Resistance) 유전자의 번역 증가
이중가닥 DNA 손상제에 의해 활성화되는 티로신 키나제인 Lyn 은 증식, 세포사멸 및 DNA 복구와 같은 다양한 신호 경로에 관여한다. 리보솜 단백질 S3 (RpS3)은 리보솜 복합체의 구성 요소로서 단백질 생합성에 관여하며 손상된 DNA 를 복구하는 엔도뉴클레아제 활성을 가진다. 이 연구에서는 rpS3 와 Lyn 이 서로 상호 작용하고 Lyn 에 의한 rpS3 의 인산화가 리보솜 이질성을 유발하여 다제 내성 유전자 1 의 유전자 산물인 p-당단백질의 번역을 상향 조절함을 입증하였다. 또한, rpS3 단백질의 두 개의 서로 다른 영역이 Lyn 의 SH1 및 SH3 도메인과 연관되어 있음을 발견하였다. 체외 면역복합체 키나제 분석은 rpS3 단백질이 rpS3 의 Y167 잔기를 인산화하는 Lyn 의 기질로 작용함을 나타낸다. 또한, 다양한 키나제 억제제를 첨가하여 rpS3 의 인산화 상태가 Lyn 과 독소루비신 모두에 의해 조절되고 Lyn 에 의한 rpS3 의 인산화가 p-당단백질 번역을 상향 조절함으로써 세포에서 약물 내성을 증가시킨다는 것을 확인하였다.
CHAPTER II. 리보솜 단백질 S3(rpS3)의 단클론 항체의 생산, 특성화 및 에피토프 매핑
RpS3(Ribosomal protein S3)는 40S small ribosomal subunit의 구성원으로 DNA repair endonuclease 활성을 포함한 다양한 extra-ribosomal 기능을 가진 다기능 단백질로 암세포에서 분비된다. 따라서 rpS3 단백질에 대한 특이성이 높은 항체는 유용한 암 바이오마커가 될 수 있다. 이 연구에서는 rpS3 단백질에 대한 다클론항체(pAb)와 단클론항체(mAb)를 생성하고 각 항체에 대해 에피토프 매핑을 수행하였다. rpS3의 아미노산 잔기는 각 mAb의 에피토프를 밝히기 위해 펩타이드 스캐닝을 통해 아미노산 185에서 243까지 스캔하였다. 결과는 pAb R2가 아미노산 203에서 230까지의 에피토프를 갖고, mAb M7이 아미노산 213에서 221까지의 에피토프를 가지며, mAb M8이 아미노산 197에서 219까지의 에피토프를 갖는다는 것을 보여주었다. 다른 특정 에피토프를 가진 rpS3에 대해 제기되고 매핑된다.