TUBB3 (Tubulin Beta 3 Class III, TUJ1)은 주로 신경세포에서 발현되며, 신경세포를 다른 세포 유형과 구별하기 위한 핵심 마커로 널리 사용되고 있다. 하지만 인간 전분화능줄기세포 (hESCs)에서 이러한 TUBB3를 통한 신경세포로의 분화 효율과 추적을 실시간으로 모니터링할 수 있는 시스템이 없다. 따라서, TUBB3를 시각적으로 확인할 수 있는 시스템을 제작하고자 하였다. 바이러스의 침입에 대한 박테리아의 면역 시스템으로 알려져 있던 CRISPR/Cas9 기술은 생명과학 연구와 의학뿐만 아니라, 유전공학에 이르기까지 여러 분야에 걸쳐 필수불가결한 도구가 되었다. 특히, CRISPR/Cas9 기술은 유전자 편집이 쉽게 활용될 수 있게 됨에 따라 이전부터 인간 전분화능줄기세포를 in vivo와 in vitro에서 레이블링하고 모니터링을 하기 위한 도구를 제작하는 데에 많이 활용되고 있다. 여기서, 본 연구에는 이러한 기술을 이용하여 TUBB3를 형광으로 확인할 수 있는 TUBB3-mCherry 리포터 세포주를 생성하였다. 확립된 TUBB3-mCherry 리포터 세포주는 전형적인 인간 전분화능줄기세포의 특성을 보였으며, 삼배엽으로 분화가 가능하였고 리포터 세포주를 신경세포로 분화하였을 시, mCherry의 발현은 내인성 TUBB3 및 MAP2와 동일한 영역에서 함께 확인되었다. 이러한 리포터 세포주는 Neurotoxin에 의한 병태생리 메커니즘 연구와 약물 선별을 위한 플랫폼을 제공할 수 있다.