본 연구의 목적은 기능성이 우수하지만 버려지고 폐기되는 부산물의 활용을 위한 가공처리 방법을 최적화하여 생강잎 (GL)의 유용성분을 최대로 추출하는 방법과 조건을 탐색하여 생강잎 (GL) 추출물의 면역자극에 대한 효과를 확인하는 것이다. 반응 표면 분석법(RSM)은 생강의 부산물인 생강잎 (GL)의 유용성분을 추출하기 위해 최적의 추출 조건을 탐색하기 위해 사용되었고, 유용성분을 추출하기 위해 사용한 가공처리 방법으로는 효소 보조 추출(EAE)이 사용되었다. 반응표면분석법을 사용한 생강잎 효소처리 추출물은 총 페놀 함량(TPC), 총 플라보노이드 함량(TFC), DPPH, ABTS 및 수율 (%)을 최대화하는 추출조건을 탐색하였다. 최적의 조건으로 추출된 추출물 (EAE)은 기존의 효소처리추출(C-EAE) 방법과 비교하였다. EAE에 대한 최적화 조건은 0.1%(v/v) 효소 농도와 33.9394(mL/g) Solvent74 solid (SS) 비율, 4시간 추출이 최적조건으로 도출되었다. 최적화된 조건에서 예측된 TPC 및 TFC, DPPH, ABTS, 수율(%)은 예측된 실험값과 유사하여 (TP: 0.94mg GAE/g, TF: 0.17mg GAE/g, DPPH: 53.26%, ABTS: 83.69%, yield: 22.85%) 사용된 RSM 모델의 적합성을 나타낸다. 통계 기반 최적화를 사용하여 반응에 대한 독립 변수의 영향을 평가할 때 TPC, TFC, DPPH, ABTS 및 수율(%)에 가장 중요한 영향을 미치는 독립 변수는 효소 농도이다. RAW264.7 대식세포에 대한 생강잎 (GL) 효소처리 추출물의 면역자극 효과를 평가하였다. 생강잎 (GL)의 처리 농도의 경우 독성실험 결과 독성이 존재하지 않는 것을 확인한 후 진행하였다. 그 결과, 세포독성이 없는 농도에서 양성대조군보다 낮은 범위에서 농도 의존적으로 산화질소(NO)와 Cytokine 발현이 증가하였고, 최적화된 EAE 추출물은 기존의 C-EAE (control) 보다 면역증강효과가 더 우수함을 확인하였다. COX-2와 iNOS의 경우 EAE 추출물이 대조군으로 사용한 C-EAE보다 높은 면역 증진 효과를 보였다. 이러한 결과는 생강잎의 EAE가 면역조절 활성을 갖는 기능성식품의 가능성을 시사한다.