표제지
적요
목차
I. 서론 9
II. 재료 및 방법 11
1. 실험 재료 11
2. 담배거세미나방의 total RNA 추출 11
3. 담배거세미나방의 first strand cDNA 합성 12
4. 담배거세미나방의 second strand cDNA 합성 12
5. 담배거세미나방의 total cDNA 분리 12
6. siRNA design 및 viral vector 제작 14
6-1. siRNA design 14
6-2. 재조합 pSINsi-hH1 제작 및 cloning 14
6-3. Envelope vector cloning 15
7. Viral vector 생산 15
7-1. GP2-293 cell 배양 15
7-2. Plasmid co-transfection 및 viral vector의 확보 16
8. Quantitative Real-Time PCR 16
9. Viral vector의 효과 분석 17
9-1. 곤충 세포 배양 17
9-2. Viral vector treatment 및 증식률 분석 18
9-3. 담배거세미나방의 치사율 분석 18
III. 결과 19
1. 담배거세미나방 ODC full-length cDNA의 확보 19
2. shRNA molecule들의 합성 및 siRNA 발현 vector 제작 21
3. 재조합 viral vector의 shRNA molecule들의 염기서열 확인 21
4. siRNA 발현성 shRNA 및 env 발현 벡터 plasmid DNA의 co-transfection과 viral vector 생산 23
5. siRNA 발현성 viral vector의 역가 분석 24
6. 곤충세포 (Sf9 cell)의 증식률 분석 26
7. 담배거세미나방의 치사율 분석 27
IV. 고찰 29
V. 참고 문헌 32
Abstract 35