목적 : ChondroT의 유전독성을 평가하기 위해 복귀돌연변이, 염색체이상, 마우스 골수세포에 대해 소핵 유발성 실험을 계획하였다.
방법 :
1. ChondroT에 대한 미생물 복귀돌연변이 유발여부를 평가를 위해 Salmonella typhimurium의 histidine 요구성 균주인 TA98, TA100, TA1535 및 TA1537 균주와 Escherichia coli의 tryptophan 요구성 균주인 WP2uvrA를 이용해 시험을 실시하였다. 대사활성계 미적용(-S9 mix)과 적용(+S9 mix) 환경에서 pre-incubation법을 이용하여 실시하였다.
2. ChondroT에 대한 염색체이상 유발여부를 평가를 위해 Chinese hamster lung cell(CHL)을 이용하여 시험을 실시하였다-S9 mix는 300, 600, 1200, 1250 및 1300 μg/mL의 농도로 설정되었으며, +S9 mix는 600, 1200, 2400, 2500 및 2600 μg/mL의 농도로 설정되어 염색체이상시험을 실시하였다.
3. ChondroT에 대한 유전독성을 평가하기 위하여, ICR 수컷 마우스의 골수세포에 대해 소핵 유발성 시험을 하였다. 각 군당 5 마리의 마우스에 0, 500, 1000 및 2000 mg/kg·B.W./day의 농도를 24 시간 간격으로 2 회 강제 경구 투여하였다. 양성대조물질(Cyclophosphamide monohydrate, CPA)은 70 mg/kg·B.W./day의 농도로 단회 복강투여 하였다.
결과 :
1. 대사활성계 미적용의 TA98, TA100, TA1537 시험균주에서 복귀돌연변이 콜로니수가 음성대조군에 비해 2 배 이상 증가되었다. 생육저해는 대사활성계 미적용(-S9 mix) 및 대사활성계 적용(+S9 mix) 모두에서 확인되지 않았으며 시험물질의 석출도 대사활성계 적용 유무에 관계없이 모든 농도에서 확인되지 않았다.
2-S9 mix와 +S9 mix에서 수적이상세포 및 염색체구조이상세포의 출현빈도는 모두 5% 미만이었다. 연속처리법(24 시간처리)에서도 수적이상세포 및 염색체구조이상세포의 출현빈도는 모두 5% 미만이었다.
3. 음성 대조군과 비교하여 시험물질 투여군에서 소핵을 가진 다염성 적혈구의 증가는 없었으며, 통계학적 유의성 또한 없었다(P〈0.05).
결론 :
1. ChondroT는 대사활성계 미적용의 TA98, TA100, TA1537 시험균주에서 복귀돌연변이 콜로니수가 음성대조군에 비해 2 배 이상 증가하여 양성소견을 보였다.
2. ChondroT는 본 시험 조건에서 CHL/IU 세포에 염색체이상을 유발하지 않았다.
3. ChondroT는 본시험 조건에서 ICR 수컷 마우스의 골수세포에 소핵을 유발하지 않았다.