표제지
목차
서론 11
PART I. Probiotics 급여가 아토피성 피부염 생쥐 모델에서 장내 미생물 및 면역조절에 미치는 영향 15
재료 및 방법 16
1. 실험설계 및 시험사료 16
2. 급성과민반응 유발 17
3. 히스타민 유도 된 피부염 유발 19
4. 쥐의 비장 및 장간막 림프구의 RNA 분리 및 분석 21
5. 장내 미생물 분석 23
6. Quantitative Real-Time PCR(qPCR) 25
7. 통계 분석 27
결과 및 고찰 28
1. Probiotics와 Sodium butyrate가 알레르기 증상 억제에 미치는 영향 28
2. Probiotics와 Sodium butyrate가 Th1 및 Treg 면역세포에 미치는 영향 30
3. Probiotics와 sodium butyrate가 장내미생물에 미치는 영향 35
4. Probiotics와 sodium butyrate가 면역 조절에 미치는 영향 38
PATR II. Prebiotics 급여가 아토피성 피부염 생쥐 모델에서 장내 미생물 및 면역조절에 미치는 영향 40
재료 및 방법 41
1. 실험 설계 및 시험사료 41
2. 세포 배양 41
3. 아토피 피부염 유발 42
4. 아토피성 피부염 중증도 평가 44
5. 쥐의 장간막 림프구의 RNA 분리 및 분석 44
6. Western blot을 이용한 단백질 발현 분석 46
7. 장내 미생물 분석 46
8. Quantitative Real-Time PCR 47
9. 통계 분석 49
결과 및 고찰 50
1. Prebiotics가 알레르기 증상 억제에 미치는 영향 50
2. T 세포 면역 반응 및 피부 장벽 관련 유전자 발현 54
3. HT29 세포주에서 TLR-9 및 Galactin-9의 단백질 발현 58
4. 장내 미생물 다양성 분석 60
5. Principal coordinate analysis(PCoA) 분석 64
6. 생쥐에서 장내 미생물 변화 분석 66
7. 장내 미생물에 의한 면역조절 효과 70
8. qPCR 분석을 통한 기능성 미생물 분석 73
적요 75
참고문헌 79
국문초록 91
ABSTRACT 94
PART I. 7
Table 1. Reverse transcription-polymerase chain reaction primer sequences for... 22
Table 2. Quantitative Real-Time PCR primer sequences for bene fi cial bacteria analysis 26
Table 3. Pyrosequencing analysis of the fecal microbiota composition from mice. 39
PATR II. 7
Table 1. RT-PCR primer sequences for immune-modulatory analysis 45
Table 2. Quantitative Real-Time PCR primer sequences for beneficial bacteria analysis 48
Table 3. Effects of dietary prebiotics supplementation on diversity of fecal microbiota... 62
Table 4. Pyrosequencing analysis of the fecal microbiota composition from mice fed the prebiotics. 68
Table 5. Clostridia cluster analysis of the fecal microbiota from mice fed the prebiotics. 71
PART I. 9
Figure 1. Experimental procedure of acute hypersensitivity response. 18
Figure 2. Experimental procedure of histamine induced vasodilation. 20
Figure 3. Experimental procedure of intestinal microbiota analysis. 24
Figure 4. Probiotic and sodium butyrate suppress allergic symptoms in mice. 29
Figure 5. Whey-allergic mice fed probiotics and sodium butyrate show enhanced Th1- and Treg-cell development in MLNs and... 32
Figure 6. Galectin-9 is expressed by intestinal epithelial cells and the probiotics and... 34
Figure 7. Pyrosequencing analysis of the fecal microbiota composition from mice fed... 37
PATR II. 9
Figure 1. Experimental procedure. 43
Figure 2. Effect of increasing percentage of dietary prebiotics on groth performance of... 52
Figure 3. Effect of prebiotics on DNCB-induced AD-like symptoms in NC/Nga mice. 53
Figure 4. Effect of prebiotics on the transcription factor and cytokine expression. 56
Figure 5. Effect of prebiotics on the galectin-9, filaggrin, TSLP expression. 57
Figure 6. Prebiotics increase TLR-9 and Gal-9 protein expression in HT29 cell lines. 59
Figure 7. Intestinal microbiota richness and diversity was increased with prebiotics. 63
Figure 8. Principal coordinate analysis (PCoA) of community strectures using a fast... 65
Figure 9. The abundance of functional bacteria in the feces of prebiotics by... 74