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Title Page
Contents
List of Abbreviations 10
I. Introduction 12
1. Policosanol 12
2. High-density lipoproteins 14
3. Apolipoprotein A-I 18
4. Reconstituted high-density lipoproteins 18
II. Materials and Methods 20
1. Materials 20
2. Purification of apoA-I 20
3. Purification of human lipoproteins 21
4. Synthesis of reconstituted HDL 21
5. Circular Dichroism and fluorospectroscopy 22
6. Wavelengths of maximum fluorescence of tryptophan 23
7. Inhibition of oxidation in LDL 24
8. Inhibition of glycation in HDL 24
9. Uptake of acLDL phagocytosis assay 25
10. Uptake of oxLDL phagocytosis assay 26
11. Cyto-protective activity of PCO against oxidative stress 27
12. Cellular anti-senescence assay 28
13. Cholesteryl ester transfer protein inhibition assay 30
14. Maintenance of zebrafish 31
15. Zebrafish fin regeneration 31
16. Imaging of reactive oxygen species 32
17. Statistical analysis 33
III. Results 34
1. Characterization of PCO-rHDL 34
2. Anti-oxidant activity of PCO 39
3. Anti-glycation activity of PCO 41
4. Inhibition of acLDL uptake by PCO-rHDL 45
5. Inhibition of oxLDL uptake by PCO-rHDL 45
6. Cyto-protective activity of PCO-rHDL 49
7. Anti-senescence activity of PCO 52
8. Inhibition of CETP activity by PCO-rHDL 54
9. Tissue regeneration effect 56
IV. Discussion 58
1. About Policosanol 58
2. Application method of policosanol 59
3. Effects on policosanol in vitro and in vivo study 60
4. Effects on policosanol in another viewpoint 61
5. Conclusion 63
V. References 64
요약 73
Table 1. Characterization of apolipoprotein A-I in lipid-free and lipid-bound states and policosanol in reconsituted high-density lipoproteins by spectroscopic analysis. 38
Fig. 1. Schematic view of HDL metabolism. 15
Fig. 2. Reverse cholesterol transport system. 17
Fig. 3. Circular dichroism analysis of lipid-free apolipoprotein A-I and... 36
Fig. 4. Native gel electrophoresis analysis of apolipoprotein A-I in lipid-free... 37
Fig. 5. Anti-oxidant activity of policosanol against low-density lipoproteins... 40
Fig. 6. Inhibition of fluorescence intensity by policosanol against fructose-mediated glycation of HDL₃. 43
Fig. 7. Electromobility of policosanol against fructose-mediated glycation of... 44
Fig. 8. Inhibition of acetylated low-density lipoproteins phagocytosis by policosanol. 47
Fig. 9. Inhibition of oxidized low-density lipoproteins phagocytosis by policosanol. 48
Fig. 10. Inhibition of reactive oxygen species production by policosanol -rHDL. 50
Fig. 11. The area of oxygen species production by policosanol-rHDL. 51
Fig. 12. Anti-senescence activity of policosanol. 53
Fig. 13. Comparison of the Cholesteryl ester transfer protein activity using... 55
Fig. 14. Tissue regeneration activity of policosanol in zebrafish tail fin. 57
초록보기 더보기
폴리코사놀은 쿠바산 사탕수수에서 추출한 8가지의 고분자 왁스 알코올 혼합물이다. 폴리코사놀은 총콜레스테롤과 중성지방, 저밀도지단백질의 콜레스테롤을 낮추어 주고 고밀도지단백질의 콜레스테롤을 높여 주어 혈관 질환을 개선해 준다고 알려 져 있어 쿠바의 지원을 받으며 전세계적으로 지질 개선 건강식품으로 각광을 받고 있다. 하지만 학계에서는 폴리코사놀의 효능에 대해 찬반 논란 중이며 그 메커니즘에 대해서는 여전히 연구가 진행 중이다.
폴리코사놀이 이러한 혈관질환을 예방한다고 알려진 데에는 혈관질환과 지단백질, 그 중에서도 고밀도지단백질과 매우 긴밀하게 연관이 되어 있기 때문이다. 폴리코사놀이 고밀도지단백질 자체의 기능으로 알려진 항산화, 항당화, 항노화, 항동맥경화기능과 제브라피쉬 조직재생에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 실험을 진행하였다. 폴리코사놀을 분자비 기준으로 인지질:콜레스테롤:아포지단백질:폴리코사놀로 이루어진 95:5:1:0, 95:5:1:1 그리고 95:5:1:5 세 종류의 비율로 재조합 고밀도지단백질을 합성하여 실험에 사용하였다.
저밀도지단백질의 산화와 고밀도지단백질의 당화 억제 실험을 진행하였다. 구리이온에 의한 저밀도지단백질의 산화와 과당에 의한 고밀도지단백질의 당화는 폴리코사놀에 의해 억제되었다. 폴리코사놀은 대식세포의 저밀도지단백질 탐식작용을 억제하고 사람섬유세포의 노화를 억제하는 것을 확인할 수 있었다. 폴리코사놀은 동맥경화의 주요 원인으로 알려진 콜레스테릴 에스터 수송 단백질의 활성을 억제시켜 주었다. 또한 동물모델인 제브라피쉬의 꼬리지느러미 조직 재생을 증가시켜 주었다.
본 연구를 통하여, 폴리코사놀이 지단백질의 산화와 당화기능을 억제하고 대식세포의 탐식작용을 억제하는 사실을 확인하였다. 또한 사람 피부 세포의 노화를 억제하며 동맥경화를 유발하는 인자로 알려진 콜레스테릴 에스터 수송 단백질의 활성을 억제시켰다. 또한 폴리코사놀이 동물모델인 제브라피쉬의 꼬리 조직 재생능을 강화시킨다는 사실을 밝혔다. 따라서 이번 연구를 통하여 폴리코사놀이 지단백질의 기능을 더욱 활성화 시킨다는 연구결과를 얻을 수 있었다.
이번 결과를 토대로 폴리코사놀의 지질대사 개선 뿐만 아니라 세포노화 억제 및 조직 재생 강화 효과를 뒷받침 할 수 있는 자료가 될 수 있을 것으로 기대된다.
원문구축 및 2018년 이후 자료는 524호에서 직접 열람하십시요.
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