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Title Page
Contents
I. Introduction 10
1. Allergic reaction 10
2. Immune system of skin 14
3. Allergic contact dermatitis 17
4. Medicinal plants 24
5. Scutellaria baicalensis 25
II. Materials and Methods 35
1. Preparation of standardized Scutellarea bacalensis aqueous extract 35
2. In vitro efficacy test 37
2.1. Inhibitory effect of WSBE in Beta-hexosaminidase release 37
3. In vivo efficacy test 38
3.1. Preventive effect of WSBE on DNCB induced allergic contact dermatitis 38
3.2. Preventive effect of WSBE on IgE-dependent cutaneous reaction 41
4. Pharmacokinetics study 43
4.1. Animals 43
4.2. Application and blood sampling 43
4.3. Assessment of blood concentration of WSBE in blood 44
5. Safety 44
5.1. Dermal irritation and corrosion test for WSBE in rabbits 44
5.2. Skin sensitization test for WSBE in guinea pig 46
6. Statistical analysis 47
III. Results 48
1. Fingerprint analysis of Scutellarea bacalensisaqueous extract 48
2. Inhibitory effect of WSBE on Beta-hexosaminidase release 50
3. Anti-inflammatory effect of WSBE in cutaneous reaction 52
4. Preventive effect of WSBE on DNCB induced contact dermatitis 57
5. Effect of WSBE on oxidative stress in DNCB induced contact dermatitis 62
6. Cytokine and immunoglobulin production in DNCB induced contact dermatitis 64
7. Pharmacokinetics of WSBE in SD rats 67
8. Irritation and corrosion of WSBE 70
9. Skin sensitization 73
IV. Discussions 75
V. Conclusions 81
VI. References 82
국문초록 114
Table 1. A comparison of common skin contact allergens 21
Table 2. Standard treatment for allergic contact dermatitis 22
Table 3. Comparison of mouse models for allergic contact dermatitis 32
Table 4. Pharmacokinetic parameters of baicalin following topical application... 68
Table 5. The changes of body weight in New Zealand white rabbits for the... 71
Table 6. Mean dermal irritation score in New Zealand white rabbits after skin... 72
Table 7. Skin sensitization score and sensitization rate of WSBE based on... 74
Figure 1. Mechanisms of allergic reactions 12
Figure 2. Skin anatomy and cellular effectors 16
Figure 3. Atopic dermatitis market 23
Figure 4. The aerial parts and the roots of Scutellaria baicalensis 26
Figure 5. Chemical structures of six Scutellarea bacalensisactive components 27
Figure 6. Extraction procedure of extract from Scutellarea bacalensis... 36
Figure 7. Representative chromatogram of standard solution(Three major... 49
Figure 8. Inhibitory effects of WSBE on the antigen-induced degranulation of... 51
Figure 9. Inhibitory effects of WSBE on ear swelling in the BALB/c mice ear... 53
Figure 10. Inhibitory effect of WSBE on mast cell number in the BALB/c mice... 54
Figure 11. Effects of WSBE on epidermal hyperplasia in the BALB/c mice ear... 55
Figure 12. Effects of WSBE on mast cell number in the BALB/c mice ear... 56
Figure 13. Effects of WSBE on cutaneous reaction in the BALB/c mice back... 58
Figure 14. Effects of WSBE on cutaneous reaction in the BALB/c mice back... 59
Figure 15. The average epidermal thickness was measured using an image... 60
Figure 16. The average number of mast cell in dermis was measured using... 61
Figure 17. Effect of topically applied WSBE on TBARS (A), NO(B), GSH(C)... 63
Figure 18. Effect of topically applied WSBE on IgE (A), TNF-alpha (B), IL-4 (C)... 65
Figure 19. Average relative spleen weight following topical application WSBE 66
Figure 20. Mean plasma concentration-time curve of baicalin following topical... 69
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본 실험은 황금의 국소처리에 의한 Allergy 성 접촉피부염의 면역과민반응 및 염증반응에 미치는 영향을 조사 하기 위해서 다양한 Allergy model 을 이용하여 알러지성 접촉성 피부염에 대한 치료효과를 평가하였다. 또한 국소처리제의 개발을 위한 안전성에 관한 기초자료를 축적하기 위해 피부자극성 및 피부감작성 등의 국소독성시험을 수행하였다.
황금은 anti-DNP IgE 에 의해 수동적으로 유도된 전신 및 피부 아나필락시 반응을 억제하였으며, 시험관내 실험에서 anti-DNP IgE 에 의해 유도된 비만세포(RBL-2H3 세포주)의 탈과립을 억제하였다. BALB/C 계 생쥐를 DNCB 처리군과 DNCB 처리 후 황금추출액을 국소적으로 피부에 도포한 황금추출물투여군으로 나누어 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB)를 도포하여 Allergy 성 접촉피부염을 유발한 뒤, 시간의 경과에 따라 contact hypersensitivity assay, 피부의 일반적인 구조, 림프구를 비롯한 염증세포, 비만세포, IgE, TNF-alpha, IFN-gamma, IL-4 의 감소를 나타내었다. 또한 피부조직내 항산화 활성을 측정하기 위해 GSH, NO, TBARS, SOD 의 변화를 관찰한 결과, 항산화 활성을 증가시켰다. 또한 토끼를 이용한 피부자극시험 및 햄스터를 이용한 피부감작성 시험에서 어떠한 피부자극성은 물론 피부감작성도 관찰되지 않았다.
상기의 결과를 바탕으로 황금추출물 피부적용은 알러지성 접촉성 피부염을 완화시키며, 피부자극성 및 피부감작성이 없는 안전한 물질로 확인되었다. 그러나, 황금추출물을 이용한 피부적용제의 개발을 위한 제형 연구와 비임상 안전성 평가 및 임상시험 등의 치료제 개발을 위한 추가연구가 필요할 것으로 판단된다.
원문구축 및 2018년 이후 자료는 524호에서 직접 열람하십시요.
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