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표제지
목차
I. 서론 7
II. 재료 및 방법 11
1. 재료 및 시료의 추출 11
2. 총 폴리페놀 함량 측정 11
3. 총 플라보노이드 함량 측정 12
4. DPPH 라디컬 소거능 측정 12
5. 시료의 추출 및 세포배양 13
6. CCK-8 assay 13
7. Scratch migration assay 14
8. Ki67 단백질 면역화학 염색 15
9. 사이토카인 분석 15
10. 자료의 처리 및 통계분석 18
III. 결과 19
1. 쥐손이풀의 총 폴리페놀, 총 플라보노이드 함량 및 전자공여능 19
2. 쥐손이풀 추출물이 hDPC의 세포증식에 미치는 영향 21
3. 쥐손이풀 추출물이 hDPC의 세포이동에 미치는 영향 23
4. GSE가 hDPC 내 Ki67 단백질 발현에 미치는 영향 26
5. 쥐손이풀 추출물이 TGF-β1의 발현에 미치는 영향 29
6. 쥐손이풀 추출물이 HGF의 발현에 미치는 영향 31
7. 쥐손이풀 추출물이 VEGF의 발현에 미치는 영향 33
IV. 고찰 35
V. 요약 및 결론 41
참고문헌 43
국문초록 52
ABSTRACT 54
Table 1. Nucleotide sequence of the primers and size of real-time RT-PCR products 17
Table 2. Total polyphenol, flavonoid content and electron donating ability of GSE 20
Table 3. Migration stimulating effect of GSE and change of scratch line width 25
Figure 1. Proliferation of hDPC treated with GSE in various concentration. 22
Figure 2. Migration stimulating effect of GSE. 24
Figure 3. Ki67 positive hDPCs in the each treatment group. 27
Figure 4. Numbers of Ki67 positive hDPCs in the each treatment group. 28
Figure 5. Expression of TGF-β1 on hDPCs treated with GSE, MXD and DEX. 30
Figure 6. Expression of HGF on hDPCs treated with GSE, MXD and DEX. 32
Figure 7. Expression of VEGF on hDPCs treated with GSE, MXD and DEX. 34
초록보기 더보기
본 연구에서는 높은 항산화능을 가진 쥐손이풀 추출물이 글루코코르티코이드로 유도된 스트레스 환경에서 모발성장에 미치는 영향에 대해 조사하였다. 쥐손이풀 추출물의 항산화특성 분석을 위하여 총 폴리페놀, 총 플라보노이드 함량 분석 및 DPPH 분석을 진행하였으며 쥐손이풀 추출물이 사람의 모유두세포에 미치는 영향을 분석하기 위하여 CCK-8 assay와 scratch migration assay를 진행하였다. 스트레스 상황에서 쥐손이풀 추출물이 모발 성장에 미치는 영향을 분석하기 위해서 Ki67 단백질의 면역염색과 TGF-β1, HGF, VEGF와 같은 모발 성장 관련 인자의 분석을 진행하였다. 스트레스 조건은 합성 glucocorticoid인 dexamethasone (DEX)으로 유도하였다. 쥐손이풀 추출물은 높은 폴리페놀, 플라보노이드 함량을 나타냈으며 전자공여능 또한 높게 분석되었다. hDPC의 증식과 이동은 쥐손이풀 추출물의 농도가 19.5 ppm일 때 가장 활발한 것으로 분석되었다. DEX 처리군에서는 Ki67 단백질 양성세포가 현저히 적게 나타났으나 GSE와 DEX를 동시처리한 군에서는 Ki67 단백질 양성세포가 NC군보다 더 높게 나타났다. TGF-β1의 상대 발현량은 GSE군에서 가장 낮았으며 DEX군에서 가장 높게 분석되었다. DEX와 GSE를 동시 처리한 군에서는 DEX군의 25.8 %에 해당하는 낮은 TGF-β1의 발현량이 분석되었다. HGF의 경우 GSE군에서 가장 높은 발현량을 나타냈으며 DEX 군에서 가장 낮은 발현량을 보였다. 그러나 GSE와 DEX를 동시처리한 군의 HGF 발현량은 NC군과 비슷한 정도로 나타났으며 그 값은 DEX군의 12배로 분석되었다. VEGF의 상대 발현량은 GSE군에서 NC군의 3.7배에 해당하는 발현량을 보였으며 DEX군에서는 NC군 대비 0.26배의 낮은 발현량을 보였다. 그러나 DEX와 GSE를 동시처리한 군의 VEGF 발현량은 NC군 정도로 회복되었다. 본 연구결과, 항산화 활성이 높은 쥐손이풀 추출물은 특정 농도에서 hDPC의 증식과 이동을 활성화시켰으며 특히 스트레스 조건에서 모발성장 억제인자인 TGF-β1의 발현을 억제함은 물론 모발성장 촉진인자인 HGF와 VEGF의 발현을 증가시켰다. 이러한 연구결과는 GSE가 모발성장에 긍정적 영향을 미칠 뿐만 아니라 탈모 예방 및 치료에 적합한 천연소재로서의 가능성을 제시하는 것으로 보인다.
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