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Title Page
Contents
ABSTRACT 4
Introduction 6
Material & Method 9
Cell culture and treatment 9
Light source and irradiation 9
HSP27 silencing by siRNA 9
Enzyme-linked immunosorbent assay for Prostagrandin E₂(PGE₂) 10
Luciferase Reporter assay 10
Nuclear extract preparations 10
Western blot analysis 11
Immunofluorescence assay 12
Detection of total ROS formation 13
Statistical analysis 13
Result 14
Effect of 635 ㎚ irradiation on PGE₂release,NF-κB activation and p-65 translocation in IKK or NF-κB-inactivated hGFs 14
Effect of 635 ㎚ irradiation on HSP27 phosphorylation in LPS-treated hGFs 18
Effect of 635 ㎚ irradiation on ROS generation in HSP27 siRNA-induced hGFs 21
Effect of 635 ㎚ irradiation on IKK, IkB, NF-kB phosphorylation and NF-kB translocation in HSP27 siRNA-induced hGFs 23
Effect of 635 ㎚ irradiation on COX-1/2 expression and PGE₂ release in HSP27 siRNA-induced hGFs 28
Discussion 31
Reference 36
초록 41
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Heat shock protein 27(HSP27)은 HSP 그룹 중 작은 조각의 하나로 염증성 반응의 조절에 NF-kB 활성과 관련된 것으로 알려져 있다. 최근 저출력 광조사/레이저 치료가 미생물 감염에 의한 치주 질환의 염증경감에 효과적인 치료라고 보고되고 있다.
그러나 광조사에 의한 NF-kB의 활성을 조절하는 기전은 불분명한 실정이다. 본 연구에서는 635 nm의 광조사가 HSP27이 저하된 세포에서 NF-kB의 신호전달에 관여하는지 알아보고 NF-kB의 활성 조절에 관여하는 인자간의 상호작용을 분석하였다.
635 nm 광조사는 LPS가 처리된 치은섬유아세포에서 HSP27의 인산화 및 ROS 발생, IKK/IκB/NF-κB 인산화, NF-κB p65 전이를 통해 COX-1/2의 발현과 PGE2 방출을 저해하였다. 그러나 HSP27이 저해된 세포주에서는 ROS 발생 및 IKK/IκB/NF-κB 인산화, NF-κB p65 전이 및 COX-1/2의 발현, PGE2 방출에 큰 변화를 갖지 못하였다. 이것은 635 nm의 광조사가 LPS에 의해 유도된 NF-κB의 신호 전달 경로에서 HSP27의 활성화 억제를 통하여 염증억제 기전을 유도한 것으로 여겨지며 따라서 HSP27이 저출력 광조사에 의한 항염증 반응을 조절하는데 중요한 역할을 하는 것으로 생각되어진다.
원문구축 및 2018년 이후 자료는 524호에서 직접 열람하십시요.
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