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Contents
국문초록 8
Abstract 10
Introduction 11
Materials and methods 13
1. Extract from Rhus verniciflua stokes (RVS) 13
2. Cell culture 14
3. Animals and xenografts 14
4. Histopathology 15
5. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) 16
6. TUNEL 18
7. Immunohistochemistry (IHC) 19
8. Electron microscopy 20
Results 21
1. Gross findings 21
2. Histopathology 23
3. TUNEL 25
4. Immunohistochemistry 27
5. Electron microscopic findings of apoptotic cells 29
6. ELISA 32
Discussion 36
References 42
Fig. 1. 13 days post xenografts of tumor cells 22
Fig. 2. 27 days post xenografts of tumor cells 22
Fig. 3. RVS injected group (H&E), necrosis, vacuolation and hemorrhage were observed in RVS injected group. Scale bar = 20 ㎛ 24
Fig. 4. Negative control group(H&E), Proliferation og tumor cell, activity cell division were observed in negative control group. Scale bar = 20 ㎛ 24
Fig. 5. RVS injected group (A), Negative control group (B) (TUNEL), Scale bar = 100 ㎛ 26
Fig. 6. RVS injected group (A), Negative control group (B) (TUNEL), Scale bar = 50 ㎛ 26
Fig. 7. RVS injected group. TNF-α immunolabelling. Scale bar = 50 ㎛ 28
Fig. 8. Negative control group. TNF-α immunolavelling. Scale bar = 50 ㎛ 28
Fig. 9. Ultrastructure of apoptotic cells. Condensed (→) and marginated nuclear chromatin (→), vacuolation in cytoplasm (→) were observed in RVS injected group. TEM. X5000(이미지참조) 30
Fig. 10. Ultrastructure of apoptotic cells. Nuclear apoptotic Fragments were observed in RVS injected group. TEM. X9000 31
Fig. 11. IL-12 level in the sera by ELISA 33
Fig. 12. INF-γ level in the sera by ELISA 34
초록보기 더보기
옻 정제액의 항종양효과에 관하여는 배양세포에서 일부 알려져 있으나, 실험동물에서 아직 연구보고 된 바 없어, 인간섬유육종 세포를 이식한 nude mouse에 옻 정제액을 투여하여 항종양 효과와 작용기전에 대하여 알아보았다.
인간섬유육종 세포를 nude mouse에 각각 ㎖당 1×107개를 접종하여 일정크기의 종양을 발생시킨 후 구강을 통하여 옻 정제액을 투여하였다. 종양조직을 절취하여 4% paraform-aldehyde로 고정하고 파라핀 절편을 만들어 Hematoxylin & Eosin 염색, 면역조직화학법 및 TUNEL 염색을 실시하여 종양 조직내 TNF-α의 존재와 Apoptosis의 진행 유무를 관찰하였으며, 투과전자현미경을 이용하여 종양조직을 형태학적으로 관찰하였다. 그리고 주기적으로 실험동물의 혈액을 채취하여 혈청내 IL-12, INF-γ와 TNF-α의 농도변화를 동시에 측정 하였다.
옻 정제액 투여군과 대조군은 종양의 성장에 있어 육안적으로 유의적인 차이가 인정되지 않았으나, 현미경학적으로는 옻 정제액 투여군의 종양조직에서 세포괴사와 출혈, 공포를 관찰할 수 있었다.
인공적으로 종양세포를 접종한 마우스의 옻 정제액 투여군에 대해, TUNEL 염색을 실시한 결과 양성반응이 관찰 되었으며, 전자현미경하에서도 다수의 apoptosis를 볼 수 있었다. 그리고 면역조직화학적으로 종양조직내에서 미약한 TNF-α 양성반응을 관찰할 수 있었으며, ELISA 검사에서는 혈청내에서 IL-12 수치의 증가를 인정할 수 있었다. 이에 반해 대조군에서는 위의 변화를 관찰할 수 없었다.
이상의 결과에서 옻 정제액은 인간섬유육종에 대해 apoptosis를 통한 유의성 있는 항종양 효과를 가지는 것으로 사료되었다.
원문구축 및 2018년 이후 자료는 524호에서 직접 열람하십시요.
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