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Title Page
Contents
I. Introduction 6
II. Materials and methods 11
1. Cell culture and transfection 11
2. Protein expression and affinity-purification 11
3. In vitro SUMO-modification 11
4. Western blotting 12
5. Immunocytochemistry 12
6. Luciferase reporter assay 12
III. Results 14
IV. Discussion 21
V. References 24
VI. 국문요약 43
Fig.1. Sumoylation of HIPK1 occurs both in vitro and in vivo. (a)... 30
Fig.2. In vitro and in vivo sumoylation of HIPK1 K25R and K219R. 31
Fig.3. Phosphorylation-dependent sumoylation of HIPK1 in vivo. 293T... 33
Fig.4. Phosphorylation-dependent sumoylation of HIPK1 in vitro. Myc... 34
Fig.5. Phosphorylation-dependent sumoylation of HIPK1 in vitro. For... 35
Fig.6. BIPKs sumoylation are increased by oxidative stress. (a)... 36
Fig.7. Sumoylation increase condition of HIPK1 By H2O2 treatment. 37
Fig.8. Analysis of HIPK1 localization. GFP-HIPK1 expressed in... 38
Fig.9. Analysis of HIPK1 K25R localization. GFP-HIPK1 K25R... 39
Fig.10. Catalytic activity of HIPK1 treated with H2O2. Myc-HIPK2... 40
Fig.11. Analysis of HIPK1 and p53 colocalization. GFP-p53... 41
Fig.12. Transactivation of p53 by HIPK1. (a) p21RE-luc reporter,... 42
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