생몰정보
소속
직위
직업
활동분야
주기
서지
국회도서관 서비스 이용에 대한 안내를 해드립니다.
검색결과 (전체 1건)
원문 있는 자료 (1) 열기
원문 아이콘이 없는 경우 국회도서관 방문 시 책자로 이용 가능
목차보기더보기
Title Page
Contents
Abstract 6
Chapter I. General Introduction 15
1. History and Distribution 15
2. Epidemiology 16
A. Host range 16
B. Reservoirs of Pasteurella multocida 17
C. Transmission 18
3. Characteristics of Pasteurella multocida 19
A. Physiological characteristics 20
B. Biochemical characteristics 20
4. Clinical signs and Pathology 21
A. Clinical signs 21
B. Gross lesions 22
C. Microscopic lesions 23
5. Serotyping 24
A. Capsular grouping 24
B. Somatic typing 24
6. Genetics of Pasteurella multocida 25
A. Metabolic genes 25
B. Outer membrane protein genes 26
C. Capsule biosynthetic genes 26
7. Aims of the study 27
Chapter II. An Outbreak of Fowl Cholera in the Baikal Teals (Anas formasa) 29
Introduction 30
Materials and Methods 33
1. Animals 33
2. Necropsy and Histopathology 33
3. Bacterial isolation 33
4. Determination of Biotype 34
5. Antimicrobial susceptibility test 34
Results 36
1. Case History 36
2. Gross Pathology 38
3. Histopathology 40
4. Microbiology 42
5. Antimicrobial susceptibility 44
Discussion 46
Summary 49
Chapter III. Somatic and Capsular Typing of Pasteurella multocida, P-627 Isolated from Baikal Teals (Anas formosa) 50
Introduction 51
Materials and Methods 54
1. Bacterial cultures 54
2. Antisera and antigen for somatic typing 54
3. Gel diffusion precipitin test 55
4. DNA extractions 55
5. PCR primers 55
6. PCR conditions 57
Results 58
1. Somatic typing 58
2. Capsular typing 60
A. Multiplex PCR for capsular typing of Pasteurella multocida 60
B. Determination on sensitivity of the multiplex PCR 62
C. Specificity of the multiplex PCR 63
Discussion 65
Summary 69
Chapter IV. Pathogenesis of Fowl Cholera in Poultry Experimentally Infected with Pasteurella multocida, P-627 Isolate 70
Introduction 71
Materials and Methods 75
1. Pathogenicity of Pasteurella multocida, P-627 75
2. Pathogenesis of fowl cholera 76
A. Animals 76
B. Challenge 76
C. Experimental design 76
D. Histopathological examination 77
E. Reisolation of Pasteurella multocida 77
F. Disseminated intravascular coagulation (DIC) examination 78
G. Immunohistochemistry 78
H. Trace minerals 78
I. Statistical analysis 79
Results 80
1. Pathogenicity of P-627 isolate 80
A. Virulence for the mouse 80
B. Pathogenicity for poultry 83
C. Bacterial recoveries and postmortem examination 87
2. Pathogenesis of fowl cholera 88
A. Clinical signs 88
B. Gross findings 89
C. Histopathologic findings 91
D. Frequency of DIC 96
E. Reisolation of Pasteurella multocida 98
F. Immunohistochemistry 99
G. Trace minerals 102
Discussion 104
Summary 109
References 111
국문초록 130
Table 2.1. Biochemical and physiological properties of Pasteurella multocida, P-627, isolated from livers of dead Baikal teals 43
Table 2.2. Anitmicrobial susceptibility of Pasteurella multocida, P-627 isolated from dead Baikal teals 45
Table 3.1. Sequences of the oligonucleotides used for Pasteurella multocida multiplex capsular PCR typing assay 56
Table 3.2. Reactivity of multiplex PCR for capsular typing of Pasteurella multocida with reference bacterial strains... 64
Table 4.1. Virulence of the Pasteurella multocida P-627, isolated from Baikal teals, in the mouse 81
Table 4.2. Mean time to death and range of days with mortality after inoculation of an isolate P-627 in commercial... 84
Table 4.3. Mean time to death and range of days mortality after inoculation of an isolate P-627 strain in broiler breeder... 85
Table 4.4. Mean time to death and range of days mortality after inoculation of an isolate P-627 in ducks 86
Table 4.5. Mortality rates of SPF chickens experimentally inoculated with Pasteurella multocida P-627 88
Table 4.6. immunohistochemical findings in SPF chickens experimentally infected with an isolate P-627 of... 101
Table 4.7. Changes in concentrations of iron, potassium, magnesium, sodium and calcium of trace minerals in sera from... 103
Fig. 2.1. Daily mortality of Baikal teals caused by fowl cholera in Cheonsoo Bay located in Chungcheonnam-do, Korea. 37
Fig. 2.2. Gross lesions of dead Baikal teals caused by fowl cholera. 39
Fig. 2.3. Histopathological lesions of dead Baikal teals caused by fowl cholera. 41
Fig. 3.1. Somatic serotyping of Pasteurella multocida by gel diffusion precipitin test. 59
Fig. 3.2. Multiplex capsular PCR amplification for Pasteurella multocida. 61
Fig. 3.3. Sensitivity of the multiplex PCR. Numbers on the lanes were indicated each amount of DNA extracted from and isolate P-627... 62
Fig. 3.4. Specificity of the multiplex PCR. Numbers above the lanes were indicated different bacterial reference and an isolate... 63
Fig. 4.1. Gross findings in a dead mouse infected with an P-627 isolate at one day after inoculation. 82
Fig. 4.2. Gross lesions of SPF chickens experimentally infected with isolate P-627. 90
Fig. 4.3. Histological and immunohistochemical (IHC) findings or lungs from chickens experimentally infected with isolate P-627; 24 (A, D), 48 (B,... 93
Fig. 4.4. Histological and immunohistochemical findings of liver (A, D), duodenum (B, E) and kidney (C, F) from the chickens infected with the... 94
Fig. 4.5. Histological and immunohistochemical findings of spleen (A, C) and thyroid gland (B, D) from chickens experimentally infected with the... 95
Fig. 4.6. Comparison on prevalence of thrombosis in the five major target organs from chickens experimentally inoculated with... 97
Fig. 4.7. Bacterial recovery from the blood. liver and spleen of chickens experimentally infected with isolate P-627 of Pasteurella... 98
초록보기 더보기
가금콜레라는 농장에 사육하는 닭, 오리, 칠면조뿐만 아니라 야생조류에도 발병하는 세균성 전염병이다. 보통 급성의 패혈증에 의한 높은 폐사율이 특징적으로 나타나지만 만성 또는 경미한 증상만을 보이기도 한다.
겨울철 철새인 가창오리 (Baikal teal;학명:Anas formosa) 에서 Pasteurella multocida 감염에 의한 가금콜레라 발생이 국내 처음으로 확인되었다. 본 질병으로 충청남도 서산시 천수만에서 월동하던 가창오리 약 10만수 중에 13,228수가 죽은 것으로 공식 확인되었다. 천수만은 시베리아에 날아온 가창오리가 국내에서 월동하는 가장 유명한 월동지로 알려진 곳이다. 가금콜레라로 죽은 가창 오리는 별 특이적인 임상증상을 보이지 않고 갑자기 폐사 되었으나 부검 결과 심하게 비대된 간장에서 다발성 흰색 괴사반점, 심외막내 점상 또는 반상 출혈점, 비장종대, 십이지장 내장내 점액성 삼출물 저류 등이 관찰되었다. 조직검사 결과 간장내 간세포괴사 및 세균 집락형성, 심장의 충·출혈과 근섬유 괴사, 출혈성 장염이 확인되었다. 죽은 가창오리의 간장과 심장에 분리한 세균을 집락 형태, 그람염색, oxidase 및 catalase 시험, MacConkey's agar, 운동성 검사 등을 통하여 최종 Pasteurella multocida 로 동정되었다. 분리된 Pasteurella multocida에 대한 약제 감수성 검사 결과 아미노글리코사이드 계통의 항생제인 겐타마이신과 가나마이신를 제거한 모든 약제에 민감하게 반응하였다.
가창오리에서 분리한 Pasteurella multocida를 P-627 이라 명명하였으며 agar gel immuno diffusion 시험결과 균체 혈청형은 1 X 12 x 14 로 확인되었다. P. multocida 는 5종의 협막 혈청형(A, B, D, E, F) 이 있는 것으로 알려져 있으며, 그중 닭과 가축에서 주로 분리되는 A, B, D 혈청형을 동시에 감별할 수 있는 multiplex PCR 기법을 혈청형 동정에 적용하였다. 가창오리에 분리한 P-627 균주는 이 기법을 적용한 결과 협막 혈청형 A로 동정되었으며, A 형은 전세계에 널리 분포하고 있으며 주로 급성형의 가금콜레라의 원인균으로 알려져 있다. 또한 닭에 쉽게 분리되는 E. coli, Sal, pullorum, R. anatipestifer et al 과도 감별이 가능하였다. 따라서 multiplex PCR 기법을 1차 배양 후 의심 세균 집락에 적용할 경우 신속하고 정확하게 Pasteurella multocida의 혈청형을 동정할 수 있을 것으로 판단된다.
P-627의 균 독력을 알아보고자 5 주령 마우스에 회석 배율별로 복강내 균을 접종한 결과 접종 후 1-2일내 대부분 모두 폐사 되었으며 50% 반수치사량(LD50) 은 1x100.5 CFU로 판명되어 매우 높은 균독력을 갖고 있는 것으로 밝혀졌다.
또한 P-627 균가 국내 사육중인 가금류 (오리, 산란계, 육용종계) 에 얼마나 병원성을 갖고 있는지 알아보고자 각 농도별로 근육 또는 기관내로 접종한 다음 폐사율을 관할하였다. 실험 감염된 가금류들은 대부분 접종 후 2-3일 이내에 폐사 되었으며 특히 근육 접종한 가금류들의 폐사율이 기관내로 감염된 개체들 보다 높았다. 죽은 모든 가금류에 대하여 육안적인 검사 결과 전형적인 가금콜레라의 병변이 확인되었으며 이들 개체에서 모두 Pasteurella multocida 가 분리 되었다. 위의 실험결과를 바탕으로 P-627 균이 국내 양계장이나 오리 농장으로 확산되었을 경우 심각한 폐사가 있었을 것으로 추측되었다.
P-627를 이용한 가금콜레라 병성기전 연구를 SPF 닭을 대상으로 실시하였다. P-627 균주를 기관내 접종한 다음 접종 후 6시간부터 120시간까지 시간대별로 병리조직검사, 면역화학적 염색법, 혈액내 미네랄검사, 균 재분리율 조사 등을 실시하였다. 죽은 닭들의 육안적인 병변으로는 급성 출혈성 패혈증 때 관찰되는 전신의 맥관계 충출혈이 확인되었으며 병리조직검사 결과 혈관내 섬유소성 혈전증이 주요 표적장기인 간장, 폐, 심장, 소장 등에서 빈번하게 확인되었다. P. multocida 항원의 시간대별 조직내 분포도를 조사하기 위하여 면역조직학적 염색법을 적용한 결과 접종 후 12시간부터 폐에서 처음 항원이 검출 되었으며, 24 시간이 경과하면서 전신의 실질장기, 즉 뇌, 갑상선, 흉선, 기관, 소장, 선위, 맹장, 간장, 폐, 심장, 비장 등에 특이적인 발색의 양성반응이 확인되었다. 면역 염색법과 비슷한 양상이 균 재분리율 조사에서도 관찰되었다. 접종 후 12시간부터 혈액, 간장, 비장에서 균이 분리되었으며 가장 높은 분리율은 접종 후 24시간과 36시간 때였다. 혈액내 철 농도(㎍/㎗) 검사에 서는 접종후 6시간때 63±14 수준이었던 것이 12시간, 24시간, 36시간대 각각 시간대 57±24, 17±10, 13±4.9 농도로 감소하여 발병기전과 철 농도와는 매우 밀접한 관계가 있는 것으로 평가되었다.
위에서 확인된 결과를 바탕으로 기관을 통해 접종된 닭들은 급성의 패혈증에 의한 다양한 실질장기의 병변과 파종성 혈관 응고증의 형성에 의한 쇼크로 폐사되는 것으로 판단된다.
원문구축 및 2018년 이후 자료는 524호에서 직접 열람하십시요.
도서위치안내: / 서가번호:
우편복사 목록담기를 완료하였습니다.
* 표시는 필수사항 입니다.
* 주의: 국회도서관 이용자 모두에게 공유서재로 서비스 됩니다.
저장 되었습니다.
로그인을 하시려면 아이디와 비밀번호를 입력해주세요. 모바일 간편 열람증으로 입실한 경우 회원가입을 해야합니다.
공용 PC이므로 한번 더 로그인 해 주시기 바랍니다.
아이디 또는 비밀번호를 확인해주세요
