표제지
목차
Ⅰ. 서론 11
1. 연구배경 11
1.1. Aβ peptide와 alzheimer's disease의 연관성 11
1.2. Aβ peptide가 연계되는 뇌 질환 진단 방법의 연관성 14
1.3. Macrophage의 Aβ peptide 식세포작용과 decursinol에 의한 Aβ42의 제거 효과 15
2. 본 연구의 필요성 16
Ⅱ. 연구 개요 17
1. Aβ42의 측정감도 개선 가능성 확인 17
1.1. Aβ42의 구조적 변화로 항체와의 민감도 증가 17
2. Decursinol과 결합된 Aβ42의 민감도 증가에 대한 가능성 확인 18
2.1. Decursinol과 Aβ42의 결합에 의한 구조적 변화로 측정 감도 증가 가능성 확인 18
Ⅲ. 실험 방법 19
1. Aβ42 측정 방법 19
2. Aβ42의 항체 민감도 개선에 대한 실험 20
2.1. pH 농도별 Aβ42의 항체 민감도 비교 실험 20
2.2. Aβ42와 항체 반응시간에 따른 민감도 비교 실험 21
3. 혈액 알칼리 전처리 보관 시 민감도 확인 실험 22
3.1. 혈액 pH 9.0 이상 전처리 보관 후 Aβ42의 민감도 확인 실험 22
3.2. 혈액 알칼리 전처리 후 pH 정상화하여 Aβ42의 민감도 확인 실험 23
4. Aβ40과 Aβ42의 민감도 개선 후 비교 실험 24
5. Decursinol과 Aβ42 결합체의 구조적 변화 및 결합력 확인 실험 25
5.1. Decursinol과 Aβ42 결합력 확인 실험 25
5.2. Decursinol과 Aβ42 구조적 변화 확인 실험 26
6. 통계처리 27
Ⅳ. 연구 결과 28
1. Aβ42의 항체 민감도 개선 28
1.1. pH 조절을 통한 Aβ42의 민감도 개선 28
1.2. 항체 반응 시간에 따른 Aβ42의 민감도 개선 35
2. 혈액 알칼리 전처리 보관 시 민감도 확인 결과 39
2.1. 혈액 pH 9.0 이상 전처리 보관 후 Aβ42의 민감도 확인 결과 39
2.2. 혈액 알칼리 전처리 후 pH 정상화하여 Aβ42의 민감도 확인 결과 43
3. Aβ40과 Aβ42의 민감도 개선 후 측정 결과 47
4. Decursinol과 Aβ42 결합체의 구조적 변화 및 결합력 확인 결과 50
4.1. Decursinol과 Aβ42 결합력 확인 결과 50
4.2. Decursinol과 Aβ42 구조적 변화 확인 결과 52
Ⅴ. Reference 56
Abstract 59
Table.1 XRD condition 26
Figure 1. Amyloidogenic and nonamyloidogenic pathways in APP. 13
Figure 2. Measurement of amyloid beta 42 in Normal plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 1 h group, Unfold : TBST pH 8.8 + 1 h group. The bars represent means±SD.... 29
Figure 3. Measurement of amyloid beta 42 in MCI plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 1 h group, Unfold : TBST pH 8.8 + 1 h group. The bars represent means±SD. 30
Figure 4. measurement of amyloid beta 42 in AD plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 1 h group, Unfold : TBST pH 8.8 + 1 h group. The bars represent means±SD. 31
Figure 5. Measurement of amyloid beta 42 in Normal plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 1 h group, Unfold : TBST pH 9.3 + 1 h group. The bars represent means±SD. 32
Figure 6. Measurement of amyloid beta 42 in MCI plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 1 h group, Unfold : TBST pH 9.3 + 1 h group. The bars represent means±SD. 33
Figure 7. Measurement of amyloid beta 42 in AD plasma samples (n=3). Natural : diluent solution +1 h group, Unfold : TBST pH 9.3 + 1 h group. The bars represent means±SD. 34
Figure 8. Measurement of amyloid beta 42 in Normal plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group. The bars represent means±SD. 36
Figure 9. Measurement of amyloid beta 42 in MCI plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group. The bars represent means±SD. Significant... 37
Figure 10. Measurement of amyloid beta 42 in AD plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group. The bars represent means±SD. 38
Figure 11. Measurement of amyloid beta 42 in pretreated Normal plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group. The bars represent means±SD. 40
Figure 12. Measurement of amyloid beta 42 in pretreated MCI plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group. The bars represent means±SD. 41
Figure 13. Measurement of amyloid beta 42 in pretreated AD plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group. The bars represent means±SD. 42
Figure 14. Measurement of amyloid beta 42 in Normal plasma samples after changing the pretreated plasma to normal pH (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30... 44
Figure 15. Measurement of amyloid beta 42 in MCI plasma samples after changing the pretreated plasma to normal pH (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30... 45
Figure 16. Measurement of amyloid beta 42 in AD plasma samples after changing the pretreated plasma to normal pH (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group.... 46
Figure 17. Measurement of amyloid beta 40 in SMI plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group. The bars represent means±SD. 48
Figure 18. Measurement of amyloid beta 42 in SMI plasma samples (n=3). Natural : diluent solution + 30 min group, Unfold : TBST pH 8.8 + 30 min group. The bars represent means±SD. 49
Figure 19. Measurement of binding force between amyloid beta 42 and decursinol (yellow). 51
Figure 20. Amyloid beta 42 XRD result. 53
Figure 21. Decursinol XRD result. 54
Figure 22. XRD results of binding Amyloid beta 42 and decursinol. 55