표제지
목차
요약 9
I. 서론 11
II. 재료 및 실험방법 15
1. 실험 재료 15
2. 세포배양 15
3. 세포독성 평가 15
4. NO 생성량 측정 16
5. RNA 추출 및 RT-PCR 17
6. Trans Epithelial Electrical Resistance (TEER) 측정 17
7. Western blot을 통한 단백질 발현 분석 18
8. 통계처리 19
III. 실험 결과 22
1. LPS 유도된 RAW264.7 세포에서 여정실 추출물 및 화합물에 의한 세포독성 및 NO 생성량 측정 22
2. LPS 유도된 RAW264.7 세포에서 여정실 추출물 및 화합물에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과 24
3. HaCaT 세포에서 여정실 유래 신규화합물에 의한 장벽개선 효과 26
4. TNF-α/ IL-17A/ IFN-γ 유도된 HaCaT 세포에서 여정실 추출물 및 화합물에 의한 세포독성 28
5. TNF-α/ IL-17A/ IFN-γ 유도된 HaCaT 세포에서 여정실 추출물 및 화합물에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과 30
6. TNF-α/ IL-17A/ IFN-γ 유도된 HaCaT 세포에서 여정실 유래 신규화합물에 의한 케모카인 발현 억제 효과 32
7. TNF-α/ IL-17A/ IFN-γ 유도된 HaCaT 세포에서 여정실 유래 신규화합물에 의한 IκB 인산화 저해 34
8. TNF-α/ IL-17A/ IFN-γ 유도된 HaCaT 세포에서 여정실 유래 신규화합물에 의한 STAT3 인산화 저해 36
IV. 결론 38
V. 참고문헌 40
Abstract 47
Table 1. Gene symbol, name and assay ID number of Taqman probe used in PCR analysis 20
Table 2. Antibody list used in western blot analysis 21
Figure 1. Method for the preparation of Ligustri Fructus extract and isolation Compounds 1-3 by CBNU (Prof. MK Lee). The Ligustri Fructus were... 13
Figure 2. Chemical structures and information of Compounds 1-3 isolated from Ligustri Fructus by CBNU (Prof. MK Lee). A new secoiridoid,... 14
Figure 3. Effects of [A] Ligustri Fructus extract, [B] Compound 1, [C] Compound 2, [D] Compound 3 on the NO production in LPS-stimulated... 23
Figure 4. Effect of Ligustri Fructus extract and Compounds 1-3 on the mRNA expression of inflammatory cytokines in LPS-stimulated RAW... 25
Figure 5. Effect of Compound 1 on Trans Epithelial Electrical Resistance (TEER) in HaCaT cells. TNF-α (20 ng/ml) decreased TEER values,... 27
Figure 6. The cytotoxity of Ligustri Fructus extract and Compound 1-3 in HaCaT cells. All data are presented as the mean ± SEM (n=3). *p... 29
Figure 7. Effect of Ligustri Fructus extract and Compounds 1-3 on the mRNA expression of inflammatory cytokines in TNF-α/ IL-17A/ IFN-γ... 31
Figure 8. Effect of Compound 1 on mRNA expression of chemokines in TNF-α/ IL-17A/ IFN-γ induced HaCaT cells. Cells were treated with... 33
Figure 9. Effect of Compound 1 on the inhibition of IκB phosphorylation by TNF-α / IL-17A / IFN-γ. [A] Compound 1 suppresses the activation... 35
Figure 10. Effect of Compound 1 on the inhibition of STAT3 phosphorylation by TNF-α / IL-17A / IFN-γ. [A] Compound 1... 37