Listeria monocytogenes는 버섯, 오징어, 족발, 훈제 연어 등 다양한 식품에서 검출 사례가 보고되었으며, 해외 수출 시 L. monocytogenes의 기준규격 위반으로 인하여 통관거부 등 무역장벽을 높이는 원인으로 작용하고 있다. 또한 L. monocytogenes의 높은 생존력과 치사율로 인해 식품으로부터 신속하게 검출하기 위한 새로운 기술의 개발이 필요하다. 본 연구는 기존의 DNA 추출 kit와 유사하거나 높은 L. monocytogenes 검출력을 나타냄과 동시에 분석 시간 및 비용을 감소시킬 수 있는 세포막 용해버퍼를 개발하는 것을 목적으로 한다. 완충용액 3종(멸균증류수, 1xPBS, 20 mM Tris-HCl)과 계면활성제 3종(1% SDS, 0.05% digitonin, 0.5% CHAPS) 조합에 0.05 N NaOH, 1 M NaCl, 8 M urea, 0.5 M EDTA 첨가 여부에 따른 세포막 용해버퍼를 제조하였다. 3.0 Log CFU/mL로 희석한 L. monocytogenes [L. monocytogenes ATCCBAA-839, ATCC13932, ATCC51774]를 세포막 용해버퍼로 현탁하고 heating block 및 microwave로 가열하여 세포막 용해 효과를 비교하였다. Conventional PCR을 통하여 세포막 용해 효과가 있다고 판단된 조합 22종에 대하여 반복실험을 진행하여 검출 반복성이 우수한 조합 3종을 도출하였고 이들 조합에 대하여 1.0 및 2.0 Log CFU/mL의 L. monocytogenes 검출 효과를 비교하였다. 식품으로부터 L. monocytogenes 검출 효과를 비교하기 위하여 L. monocytogenes 검출 이력이 있는 농·축·수산물 대표 식품을 1종씩 선정하였다. 팽이버섯, 족발, 오징어에서 검출 사례가 보고되었으나 팽이버섯의 경우 높은 L. monocytogenes 오염률을 나타내어 버섯류 중 L. monocytogenes 오염률이 낮은 새송이버섯으로 대체하여 실험을 진행하였다. L. monocytogenes를 3.0, 4.0 및 5.0 Log CFU/g이 되도록 식품에 접종하였고 시판 DNA 추출 kit 3종, 개발 세포막 용해버퍼 그리고 개발 세포막 용해버퍼와 세척버퍼로 DNA를 정제하였을 때의 DNA 추출 여부를 conventional PCR 및 real-time PCR로 비교하였다. 시간 및 비용 분석을 진행한 결과 DNA 추출이 완료되기까지 소요되는 시간 및 비용이 가장 적게 소요되는 방법인 멸균증류수, 0.5% CHAPS, 0.05 N NaOH 조합 및 microwave 가열 방법을 최종적으로 선정하였다. 해당 세포막 용해버퍼는 199원의 비용으로 약 20분안에 L. monocytogenes DNA를 추출할 수 있었다. 식품으로부터 추출한 L. monocytogenes DNA를 conventional PCR로 증폭한 결과, 개발 세포막 용해버퍼 사용 시 검출한계는 4.0 Log CFU/g으로 시판 DNA 추출 kit 대비 유사한 수준이거나 높았으나, silica-membrane-based column 및 세척 과정을 거쳐 DNA의 정제 후의 검출한계는 낮아져 3.0 Log CFU/g의 L. monocytogenes에 오염된 식품을 판별할 수 있었다. Real-time PCR 결과, 농·축산물에서는 개발 세포막 용해버퍼와 세척버퍼로 DNA의 정제 과정을 거치면 검출한계는 낮아지는 것을 확인하였으며 C t 값 비교를 통한 L. monocytogenes의 정량적 검출이 가능하였다. 농산물에서는 시판 DNA 추출 kit 3종 중 TaKaRa 사의 제품과 개발 세포막 용해버퍼 및 세척버퍼를 사용하였을 경우 3.0 Log CFU/g까지 검출 가능하였으며 Ct 값은 시판 DNA 추출 kit에 비하여 높은 값을 나타내었지만 통계적 유의차는 없었다. 축산물에서는 개발 세포막 용해버퍼 및 DNA의 정제 과정을 거쳤을 경우에만 3.0 Log CFU/g 이상의 L. monocytogenes를 검출할 수 있었다. 수산물에서는 시판 DNA 추출 kit와 개발 세포막 용해버퍼 모두 검출한계는 3.0 Log CFU/g이었으며 개발 세포막 용해버퍼의 Ct 값은 시판 DNA 추출 kit에 비하여 높았지만 유의미한 차이를 보이지는 않았다. 본 연구에서 개발한 멸균증류수, 0.5% CHAPS, 0.05 N NaOH 조합의 세포막 용해버퍼는 DNA 추출 시간 및비용을 절감함과 동시에 시판 DNA 추출 kit 대비 유사하거나 향상된 L. monocytogenes 검출력을 가지는 것으로 판단된다. 해당 세포막 용해버퍼를 산업 현장에 적용하여 L. monocytogenes의 신속하고 간편한 자가 검사가 가능할 것으로 기대된다.