표제지
목차
Abbreviation 13
국문요약 14
I. 서론 16
1. 알러지성 질환에서 면역세포의 역할 16
2. 알러지성 질환에서 염증성 물질의 역할 20
3. 알러지성 질환에서 Th2 사이토카인 역할 20
4. 알러지성 질환에서 MAPKs의 역할 25
5. 백목련의 성분 및 생리활성 29
6. 연구목적 34
II. 실험재료 및 방법 35
1. 백목련 과실 메탄올 추출물 35
2. 세포 배양 37
2.1. Raw 264.7 cell 37
2.2. EL-4 T cell 37
3. 실험 방법 37
3.1. 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl-2,5-Diphenyl-tetrazolium (MTT) assay 37
3.2. Nitrite 측정 38
3.3. ELISA 38
3.4. RT-PCR 39
3.5. Luciferase assay 42
3.6. Western blot 42
3.7. 통계 처리 44
III. 실험결과 44
1. MFME가 세포생존율에 미치는 효과 44
1.1. Raw 264.7 세포 생존율에 미치는 효과 44
1.2. EL-4 T 세포 생존율에 미치는 효과 45
2. MFME가 대식세포의 염증성 물질 생성에 미치는 효과 47
2.1. MFME가 NO 생성에 미치는 효과 47
2.2. MFME가 TNF-α 생성에 미치는 효과 49
3. MFME가 T세포의 Th2 사이토카인 생성에 미치는 효과 50
3.1. MFME가 IL-4 발현에 미치는 효과 51
3.2. MFME가 IL-13 발현에 미치는 효과 57
4. MFME가 전사인자 발현에 미치는 효과 63
4.1. MFME가 GATA-3 mRNA발현에 미치는 효과 63
4.2. MFME가 GATA-3발현에 미치는 효과 63
4.3. MFME가 AP-1 발현에 미치는 효과 64
4.4. MFME가 NF-ATc1 발현에 미치는 효과 65
4.5. MFME가 NF-κB 발현에 미치는 효과 65
5. MFME가 MAPKs의 활성에 미치는 효과 72
5.1. MFME가 ERK의 활성에 미치는 효과 72
5.2. MFME가 JNK의 활성에 미치는 영향 72
5.3. MFME가 p38 MAPK의 활성에 미치는 영향 72
IV. 고찰 77
V. 결론 86
VI. 참고문헌 87
ABSTRACT 105
Table 1. Biological activities of the fructus of Magnolia denudata 32
Table 2. Sequences of primer used for RT-PCR 41
Table 3. Effects of MFME on cell viability of EL-4 T cells and Raw 264.7 cells 46
Figure 1. T-cell mediated allergic mechanisms 19
Figure 2. Overview of the regulatory regions in the IL-4 and IL-13 promoters 22
Figure 3. Schematic summary of the NFAT activation pathways in T cells. 24
Figure 4. GATA-3 pathway in activating the Th2 cytokine genes expression 26
Figure 5. Schematic overview of MAPK signaling cascade. 30
Figure 6. The fructus of Magnolia denudata 33
Figure 7. HPLC chromatogram of the methanol extract of M.denudate fructus. 36
Figure 8. Effects of MFME on NO production of LPS-stimulated Raw 264.7 cells. 48
Figure 9. Effects of MFME on TNF-α production of LPS-stimulated RAW 264.7 cells. 50
Figure 10. Suppressive effect of MFME on IL-4 production inactivated EL-4 T cells. 52
Figure 11. Inhibitory effect of MFME on IL-4 mRNA expression in activated EL-4 T cells. 54
Figure 12. Suppressive effects of MFME on IL-4 promoter activation. 56
Figure 13. Effect of MFME on IL-13 production in activated EL-4 T cells. 58
Figure 14. Effect of MFME on IL-13 mRNA expression inactivated EL-4 T cells. 60
Figure 15. Suppressive effects of MFME on IL-13 promoter activation. 62
Figure 16. Inhibitory effect of MFME on GATA-3 mRNA expression in activated EL-4 T cells. 66
Figure 17. Inhibitory effects of MFME on GATA-3 protein expression in EL-4 T cells. 67
Figure 18. Effects of MFME on c-Fos protein expression in EL-4 T cells. 68
Figure 19. Effects of MFME on c-Jun protein expression in EL-4 T cells. 69
Figure 20. Inhibitory effect of MFME on NF-ATc1 protein expression in EL-4 T cells. 70
Figure 21. Effect of MFME on NF-κB p65 protein expression in EL-4 T cells. 71
Figure 22. Effect of MFME on PI-induced phosphorylation of ERK in EL-4 T cells. 74
Figure 23. Effect of MFME on PI-induced phosphorylation of JNK in EL-4 T cells. 75
Figure 24. Effect of MFME on PI-induced phosphorylation of p38 in EL-4 T cells. 76
Figure 25. Potential mechanisms of MFME 85